细胞背景与来源做肠癌或者肠道内分泌方向的朋友大概率见过 NCI-H716 这个名字。它是从人结直肠腺癌里来的细胞株最大的特点是自带内分泌属性——这在结直肠细胞系里不算常见所以研究胃肠道激素、GLP-1 分泌的课题常拿它当模型。NCI-H716 是人结直肠腺癌细胞1984 年从一位 33 岁白人男性结肠腺癌患者的腹水转移灶里分离出来取样前患者还用过 5-氟尿嘧啶治疗。细胞里含多巴脱羧酶胞质里有致密核心颗粒——这种颗粒正是内分泌细胞的标志。它不表达 TAG-72、CA19-9也不产 CEA。结直肠癌研究、3D 培养、肠内分泌/GLP-1 相关研究都能用上它。来源人结肠腺癌腹水转移灶。形态上属于半贴壁细胞主要呈聚团悬浮生长少量分散悬浮还有一部分会贴瓶底。细胞团个头不算小要用枪头轻吹把大团打散成小团免得团块中间的细胞被“饿死”。应用场景与研究价值肿瘤学结直肠癌的发生、耐药、药物筛选尤其 5-FU 相关。内分泌/代谢作为肠内分泌细胞模型研究 GLP-1、胃肠激素的分泌调控是糖尿病药物研发里的常用工具。3D/类器官方向本身有成团生长特性适合做 3D 或球体培养。培养特性与注意事项培养基RPMI 1640 10% FBS 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。营养消耗快培养基容易变黄1-2 天换一次液比较稳。传代离心法900-1000 rpm、3 min 收集或直接分瓶法推荐 1:2。吹打要轻、离心转速别太高别把细胞打散成单个。换液状态好就离心换液状态差、团块小的时候别频繁离心改用半换液法竖瓶增加局部密度再补 5% FBS终浓度到 15%让它缓过来。冻存92% FBS 8% DMSO或 92% 完全培养基 8% DMSO密度约 300 万/mL/管程序降温盒 -80℃ 过夜后转液氮。复苏37℃ 水浴 2 min 内融化离心去上清后接种。生物安全BSL-1人源细胞操作按 BSL-2 的个人防护习惯来更稳妥。注意细胞碎片多是正常现象密度够高时低速离心去一部分即可别频繁离心。如果不想从零配培养基、做鉴定尚恩生物SUNNCELL直接有 NCI-H716 现货货号 SNL-399配套专用培养基也齐细胞做过 STR 鉴定收货后还有一对一技术支持新手也能少踩坑。