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单核/巨噬细胞分化的老牌模型 U-937,悬浮培养要注意这几点

单核/巨噬细胞分化的老牌模型 U-937,悬浮培养要注意这几点 做单核-巨噬细胞分化、炎症或者毒理方向的朋友多半用过 U-937。它是很经典的一株人源单核细胞系悬浮生长最出名的本事就是能被一堆诱导剂“点化”成巨噬细胞样细胞。U-937 是人组织细胞淋巴瘤单核细胞系1974 年由 Sundstrom 和 Nilsson 建立来源是一名 37 岁白人男性组织细胞淋巴瘤患者的胸腔积液。它能被人混合淋巴细胞培养上清、佛波酯PMA、维生素 D3、γ 干扰素、TNF 和维甲酸诱导终末单核细胞分化免疫球蛋白和 EB 病毒表达阴性表达 Fas 抗原、对 TNF 和抗 Fas 抗体敏感。主要用于单核/巨噬细胞分化、免疫学、3D 培养和毒理学研究也是常用的转染宿主。细胞背景与来源来源人组织细胞淋巴瘤胸腔积液。悬浮生长圆形有少量聚团。培养时会自然产生一些细胞碎片属正常现象。应用场景与研究价值免疫学PMA 诱导单核→巨噬细胞分化研究吞噬、炎症因子分泌。信号通路Fas/TNF 凋亡通路研究。毒理学与转染毒性评价、基因转染宿主也适合 3D 培养。培养特性与注意事项培养基RPMI 1640 10% FBS 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。悬浮生长有密度依赖——接种建议 50 万/mL 左右长到 80 万/mL 就能传代比例 1:2别种太稀。传代离心法900-1000 rpm、3 min或直接分瓶法吹打要轻、转速别太高。换液状态好离心换液状态差用半换液法别频繁离心折腾它。冻存92% FBS 8% DMSO或 92% 完全培养基 8% DMSO密度 200-300 万/mL/管程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏37℃ 水浴 2 min 内150g 离心 2 min。生物安全BSL-1人源细胞建议按 BSL-2 防护操作。注意碎片多在密度低时别离心去等长够密度再说。悬浮株对密度和操作频次敏感新手容易养废。尚恩生物SUNNCELL有 U-937 现货货号 SNL-049配套专用培养基细胞做过 STR 鉴定收货后还有技术支持兜底。
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